bh荧光寿命成像FLIM系统

荧光寿命成像FLIM系统


德国Becker&Hickl公司,专注于荧光寿命测量及荧光寿命显微(FLIM)领域的研究及产品系统研发,利用其独特的高分辨率多维TCSPC技术,不断的推动FLIM技术的前进。基于bh公司常年的FLIM研究,可以提供基于各种显微镜的FLIM系统升级,方案灵活,性能可靠。

bh FLIM系统具备很多其他FLIM系统不具备的特点:

  • 与活细胞成像的良好兼容性
  • 极高的时间分辨率和光子效率
  • 将衰减函数分解成多个衰减分量的能力
  • 激发波长多路复用与并行多通道探测相结合的能力
  • 快速生理效应引起的动态寿命效应记录能力
  • FLIM/PLIM 同时记录的能力

bh公司可提供完整的 DCS-120 共聚焦/双光子FLIM系统和基于纳米位移台的 PZ-FLIM-110 FLIM系统,也可以为各类显微镜提供升级模组。除了单个通道的升级,也可进行多通道的升级。此外,还可提供FASTAC快速采集FLIM升级,最短采集时间低至100ms。

荧光寿命成像显微系统

DCS-120 FLIM系统

  • 成像分辨率可达2048×2048
  • 可配置单光子/多光子激发
  • 可配置NIR Ⅱ区/超连续谱光源激发
  • 可更换主二向色镜
  • 11档电动更换针孔
  • FLIM/PLIM 同时采集

DCS-120 MACRO FLIM系统

  • 成像分辨率可达2048×2048
  • 扫描视场直径可达15mm
  • 空间分辨率可达25μm
  • 可配置超连续谱光源激发
  • 可更换主二向色镜
  • FLIM/PLIM 同时采集

PZ-FLIM-110 系统

  • 成像分辨率可达2048×2048
  • 2D/3D 纳米位移台扫描
  • 可配置超连续谱光源激发
  • 可配置NIR Ⅱ区激发
  • X-Y,X-Z 扫描
  • FLIM/PLIM 同时采集
bh-Versuch-Interaction-Imager-Bild

分子相互作用成像仪

  • 开箱即用型FLIM-FRET显微镜
  • 免校准成像
  • 全光纤ps激光器覆盖375-785nm FRET探针
  • 全电动样品台
  • 适合任何FRET染料对
  • 视频帧率FLIM采集
bh-Versuch-MEtabolic-Imager-Bild

代谢成像仪

  • NADH和FAD双光子显微
  • 两台光纤飞秒激光器(780 nm & 920 nm)
  • 探测范围250-720nm
  • 全电动样品台
  • 激光波长复用激发
  • 视频帧率FLIM采集

显微镜FLIM升级模组


FLIM系统构成


FLIM系统结构

脉冲激光器
  • Ti:Sapphire飞秒激光器
  • bh 皮秒二极管激光器
  • 超连续谱激光器
空间扫描单元
  • 扫描振镜(bh DCS-120扫描头,激光共聚焦/双光子显微镜等)
  • 2D/3D纳米位移台(AFM,NSOM等)
显微镜
  • Zeiss/Leica/Olympus/Nikon/其他
  • 大数值孔径物镜(宏观样品)
单光子探测器
  • PMT/计数型PMT
  • MCP型PMT/位置敏感型PMT
  • SPAD/APD
  • Hybrid型PMT探测器
  • 超导纳米线单光子探测器
  • 计数型InGaAs探测器
  • 光谱型PMT探测器
TCSPC计数器
  • bh多维TCSPC计数器
FLIM软件
  • SPCImage NG采集分析软件


TCSPC FLIM原理


荧光寿命与FLIM技术


荧光寿命是指分子在单线激发态所平均停留的时间。它不仅与物质自身的结构有关,而且与其所处微环境的极性、粘度等条件有关,因此通过荧光寿命测定可以直接了解物质及所在体系发生的变化。荧光现象多发生在纳秒级,正好是分子运动的时间尺度,因此测量荧光寿命可以“看”到许多复杂的分子间作用过程,例如超分子体系中分子间的簇集,固液界面上吸附态高分子的构象重排、蛋白质高级结构的变化等。由于荧光寿命是所研究系统的固有特性,与细胞内各处荧光探针的局部浓度无关,且不受光漂白和散射的影响,与荧光成像相比有更多优势

FLIM-荧光寿命成像显微,是将荧光寿命测量与激光扫描共聚焦显微镜等样品扫描技术相结合的成像技术,通过扫描可以得到样品各空间点荧光强度随时间变化情况。

 

FLIM应用


 bh公司不只是将FLIM考虑成一种增加显微图像额外对比度的方法,更是将其考虑及设计为一种分子成像技术:bh FLIM技术利用了荧光团的荧光衰减函数是其分子环境的指标,以及多指数衰减分析提供了分子信息的特性,例如活细胞和组织的代谢状态,蛋白质构象和蛋白质相互作用,细胞对药物和环境参数的反应,以及癌症发生和进展的机制等。

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